Главная

Исследовательские группы

Научно-практический журнал
Хвойные бореальной зоны
(в перечне ВАК)

Введение

В настоящее время на территории Российской Федерации отмечается стабильный рост заинтересованности населения в массовом освоении так называемых "даров леса" – дикорастущих грибов, ягод и растений, пригодных к употреблению в пищу или имеющих иные полезные свойства. По экспертным оценкам, в последние годы объемы заготовок населением съедобных грибов увеличились в 2-5 раз (Егошина, 2005). Расширяется ассортимент заготавливаемых грибов, все чаще используются не только традиционно собираемые и известные всем виды грибов, такие как белый гриб (Boletusedulis), подосиновики (Leccinumtestaceoscabrumи L. aurantiacum), лисичка (Cantarelluscibarius) или груздь(Lactariusresimus), но и малоизвестные, редко употребляемые, условно съедобные или даже несъедобные виды. Интерес к использованию незнакомых видов грибов в значительной степени стимулируется появлением большого количества пособий и справочников по сбору грибов, их использованию в пищу и в качестве лекарственных средств (Додик, 2001; Казьмин, 2005; Юдин, 2008). Авторы многих таких трудов не являются специалистами в области микологии и при написании книг чаще всего пользуются малопроверенными, неподтвержденными результатами исследований данными. Поэтому в списках съедобных или лекарственных грибов, опубликованных в таких изданиях, нередко встречаются несъедобные и даже ядовитые виды, использование которых может быть опасно для здоровья человека. Очень часто в изданиях, посвященных дикорастущим грибам, рекомендуются к использованию плодовые тела грибов из родов Навозник(Coprinus), Мухомор(Amanita), Волоконница(Inocybe) и Гифолома (Hypholoma). Так, виды рода Coprinus – C. atramentarius, C. comatus, C. micaceus только при особых условиях рассматриваются как пригодные в пищу (съедобны только молодые плодовые тела с белыми и розоватыми пластинками, нельзя сочетать употребление грибов с приемом спиртных напитков). Эти виды грибов могут также использоваться и как лекарственные средства (Денисова, 1998; Jianzhe et al.,1987). Достаточно часто в литературе также встречаются рекомендации по использованию плодовых тел ряда видов рода Amanita (обычно это виды A. muscaria и A. citrina), родов Inocybe (I. lacera, I. rimosa) и Hypholoma (H. fasciculare, H. sublateritium, H. marginatum) для лечения некоторых заболеваний человека (Денисова, 1998; Булах, 2001; Филиппова, 2006; Кириллов, 2008).
Согласно материалам научных исследований (Amirati et al., 1986; Мусселиус, Рык, 2002), многие представители перечисленных родов агарикоидных базидиомицетов обладают сильным токсическим действием.
Для оценки возможности использования вышеуказанных видов агарикоидных базидиомицетов в пищу или применения в качестве лекарственных средств был осуществлен комплекс лабораторных исследований по определению их токсичности для биологических объектов.

МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЙ

В экспериментальной работе по определению токсичности биологических объектов обязательным является проведение испытаний на фитототоксичность, антибактериальную активность и токсичность для млекопитающих.
Для анализа были отобраны пробы грибов – представителей семейств Мухоморовые (Amanitaceae) – Мухомор красный (Amanitamuscaria var. muscaria (L.) Lam.) и Мухомор лимонно-желтый (Amanitacitrina(Schaeff.) Pers.), Паутинниковые (Cortinariaceae) – Волоконница рваная (Inocybelacera(Fr.) P.Kumm.), Навозниковые (Coprinaceae) – Навозник чернильный (Coprinusatramentarius(Bull.) Fr.), Навозник лохматый (Coprinuscomatus(O.F. Mull.) Gray) и Навозник мерцающий (Coprinusmicaceus(Bull.) Fr.); Строфариевые (Strophariaceae) – Гифолома окаймленная (Hypholomamarginatum(Pers.) J. Schrot.). В качестве контроля использовался экстракт средневозрастных плодовых тел белого гриба (Boletusedulis var. edulis Bull.), который является съедобным видом I категории и не содержит микотоксинов (Санитарные правила…, 1993). У видов рода Coprinus в эксперименте исследовались 2 типа плодовых тел: "молодые" – с белыми пластинками и "старые" – зрелые плодовые тела с чернеющими пластинками.
Биотестирование токсичности выбранных видов грибов было проведено на следующих группах живых организмов: бактериях рода Bacillus, растениях (пшеница обыкновенная (Triticumaestivum), фасоль обыкновенная (Phaseolusvulgaris), горчица полевая (Sinapisarvensis), гречиха посевная (Fagopyrumesculentum)) и млекопитающих (лабораторных мышах (Musmusculusdomesticus).
В работе использовались экстракты перечисленных видов грибов, которые готовились следующим образом: навеску в количестве 1 г порошка размолотых сухих плодовых тел грибов, заливали 10 мл дистиллированной воды, настаивали в течение 24 часов при комнатной температуре и фильтровали. Полученный экстракт в концентрации 0,1 г/мл использовали для исследования токсических свойств в отношении живых организмов.

ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНАЯ ЧАСТЬ

Исследование антибактериальных свойств. Исследование токсического влияния экстракта плодовых тел грибов на микроорганизмы проведено на наиболее чувствительных к микотоксинам штаммах бактерий Bacillussubtilis (лабораторный штамм) и Bacilluscereus8035 (штамм из Государственной коллекции микроорганизмов ГИСК им. Л.А. Тарасевича, номер штамма ГКПМ 010014). Штамм B. cereus часто используется в фармакологической практике в качестве индикаторного для оценки активности препаратов прополиса.
На поверхность агаровой среды в чашках Петри наносили 2 мл бульонной культуры тест-штаммов B.subtilis и B. cereus. Сверху на нее укладывали специальные диски из фильтровальной бумаги, смоченные 10-50 мкл экстракта плодовых тел тестируемых грибов, после чего чашки закрывали крышками и инкубировали в термостате при температуре +37 ?С в течение 24 часов. Затем визуально оценивали степень развития колоний бактерий под диском и на его периферии, и отмечали наличие факта ингибирования роста колоний.
Результаты проведенных исследований антибактериальной активности экстрактов плодовых тел базидиальных грибов представлены в таблице 1.

Таблица 1 – Результаты изучения антибактериальной активности экстрактов плодовых тел исследованных видов базидиальных грибов

№ п/п	Вид	pH экстракта	Антибактериальная активность в отношении
			Bacillus subtilis	Bacillus cereus
1	Boletus edulis var. edulis Bull.	4,9	-	-
2	Hypholoma marginatum (Pers.) J. Schrot.	5,6	±, отдельные стерильные участки	-
3	Inocybe lacera (Fr.) P.Kumm.	5,1	слабая, стерильная зона 0,1 мм	слабая, стерильная зона 0,5 мм
4	Coprinus atramentarius (Bull.) Fr.	5,7	средняя, стерильная зона 2,0 мм	средняя, стерильная зона 3,0 мм
5	Coprinus comatus (O.F. Mull.) Gray, молодые плодовые тела	6,9	±, отдельные стерильные участки	±, отдельные стерильные участки
6	Coprinus comatus(O.F. Mull.) Gray, старые плодовые тела	6,8	±, отдельные стерильные участки	±, отдельные стерильные участки
7	Amanita muscaria var. muscaria (L.) Lam., ножки	5,1	-	-
8	Amanita muscaria var. muscaria (L.) Lam., шляпки	5,4	-	-
9	Coprinus micaceus(Bull.) Fr.	6,3	-	-
10	Amanita citrina(Schaeff.) Pers.	5,7	-	-
	Дистиллированная вода, контроль	6,8	-	-

Примечание: "-" – не активен, "±" – очень слабая антибактериальная активность.

Рисунок 1 - Влияние экстрактов плодовых тел исследованных видов базидиальных грибов на всхожесть (%) семян растений (1 - Boletus edulis,          2 - Hypholoma marginatum, 3 - Inocybe lacera,                 4 - Coprinusatramentarius, 5 - Coprinuscomatus, мол.ПТ, 6 - Coprinuscomatus, стар.ПТ, 7 - Amanitamuscaria, ножки, 8 - Amanitamuscaria,шляпки, 9 - Coprinus micaceus, 10 - Amanita citrina, 11 - Дистиллированная вода)

Исследование токсичности экстрактов плодовых тел базидиальных грибов для млекопитающих. Эксперимент проводился на белых беспородных лабораторных мышах (Musmusculusdomesticus), по 8 особей на каждую пробу экстракта грибов, которым ежедневно перорально вводили экстракты исследуемых грибов в объеме 0,1 мл на прием. Результаты эксперимента показали, что явлений острой токсичности у мышей при пероральном введении экстрактов H. marginatum, I. lacera, C. atramentarius, A. muscaria, C. micaceus и A. citrina не отмечено. Все мыши остались живыми и сохраняли активность в течение всего периода эксперимента.
Наиболее токсичным оказался экстракт C. comatus, который вызвал летальный исход у двух особей на 5-е и 6-е сутки после начала эксперимента. Причиной смерти мышей явились выраженные гемомикроциркуляторные расстройства в легких, печени и почках. При вскрытии у погибших особей были выявлены следующие поражения внутренних органов: в легких были отмечены очаги кровоизлияния, потеря воздушности, легкие были тусклые и дряблые; печень была заметно увеличена, темно-коричневого цвета, дряблая, тусклая на разрезе; почки были несколько увеличены в размерах, набухшие, дряблые, темно-вишневого цвета; селезенка увеличена, дряблая, капсула морщинистая, темно-вишневого цвета.

ВЫВОДЫ

Результаты токсикологического скрининга отобранных видов агарикоидных базидиомицетов показали следующее. Плодовые тела исследованных видов грибов из рода Coprinus отличаются наиболее высоким уровнем токсичности для живых организмов, что делает невозможным их использование в пищу. Высокая антибактериальная активность некоторых изученных видов грибов (Hypholoma marginatum, Inocybe rimosa, Coprinus atramentarius, C. comatus) показывает перспективность их использования в качестве антисептиков или антибиотиков. Все исследованные виды рода Amanita не токсичны для бактерий. Экстракт Amanitamuscaria отличается сильными фитотоксическими свойствами. Отсутствие явлений острой токсичности для млекопитающих позволяет допустить использование представителей рода Amanita в качестве лекарственных средств в гомеопатических дозах.

БИБЛИОГРАФИЧЕСКИЙ СПИСОК

Булах, Е.М. Грибы – источник жизненной силы / Е.М. Булах. – Владивосток: Русский Остров, 2001. – 64 с.
Денисова, Н.П. Лечебные свойства грибов. Этномикологический очерк / Н.П. Денисова. – СПб: Изд.СПбГМУ, 1998. – 59 с.
Додик, С.Д. Грибы российских лесов / С.Д. Додик. – М.: ООО "Издательство АСТ", 2001. – 320 с.
Егошина, Т.Л. Недревесные растительные ресурсы России /Т.Л. Егошина. - М., 2005. - 80 с.
Казьмин, В.Д. Лечение мухоморами и другими ядовитыми и несъедобными грибами / В.Д. Казьмин. – Ростов н/Д: Феникс, 2005. – 96 с.
Мусселиус, С.Г. Отравления грибами / С.Г. Мусселиус, А.А. Рык.– М., 2002. – 324 с.
СП 2.3.4.009-93. Санитарные правила по заготовке, переработке и продаже грибов: утв. Пост. Госкомсанэпиднадзора РФ от 2.08.93. – М.,1993. – 50 с.
Филиппова, И.А. Популярная фунготерапия: лечение лекарственными грибами / И.А. Филиппова. – СПб.: "Издательство "Диля", 2006. – 128 с.
Юдин, А.В. Большой определитель грибов / А.В. Юдин. – М.: АСТ: Астрель, 2008. – 254 с.
Amirati, J.F. Champignons veneux et nocifs du Canada / J.F. Amirati, J.A. Traquair, P.A. Horgen. Ed.M.Broquet. – Agricult. Canada. – 1986. – 394 pp.
Jianzhe, Y. Icons of medicinal fungi from China / Y. Jianzhe, M. Xiaolan, M. Qiming, Z. Yichen, W. Huaan. – Beijing: Science Press. – 1987. – 576 pp.
Kirillov, D.V. The use of mushrooms in folk medicine of taiga zone of Russia / D.V. Kirillov // The 12-th International Congress Phytopharm 2008. Abstracts book. – St Petersburg. – 2008. – P.56.